اندازه گيري غلظت پراکسید هیدروژن (H2O2)
آمادهسازي محلولها:
1. محلول 1% اسيدتري كلرواستيك: 1گرم اسيد تريكلرواستيك را در آب مقطر حل نموده و به حجم نهايي ml 100 رسانيده شد.
2. محلول يديدپتاسيم يك مولار ( MW=166): مقدار ۵/۴۱گرم يديدپتاسيم را در آب مقطر حل نموده، به حجم نهايي ml 250 رسید.
3. جهت تهيه بافر فسفات mM 10 : مقدار یک میلی لیتر از بافر فسفات تهيه شده در بخش قبلي به حجم ml 100 رسانيده شد.
روش كار:
1. یک گرم نمونه برگ را خرد كرده به آن ml 5 محلول اسيد تريكلرواستيك w/v) 1%) اضافه گردید.
2. نمونه هموژنيزه شده در g 12000 به مدت 15 دقيقه سانتريفیوژ شد.
3. ۵/۰ میلی لیتر از محلول رويي سانتريفوژ شده به ۰/۵ میلی لیتر محلول بافر فسفاتپتاسيم ۱۰ میلی مولار (7=pH) و یک میلی لیتر محلول یک مولار از KI اضافه گردید.
4. استانداردها: محلولهاي H2O2 را در غلظتهاي بين mM ۲-۱۰ تهيه كرده. نمودار استاندارد را رسم گردید.
5. ميزان جذب با استفاده از دستگاه اسپكتروفتومتر UV-VIS در طول موج nm 390 اندازهگيري شد.
منابع:
حسیبی، پیمان. 1386. بررسی فیزیولوژیکی اثر تنش سرما در مرحله گیاهچه ای ژنوتیپ های مختلف برنج. رساله دکتری تخصصی. دانشگاه شهید چمران اهواز. 145 صفحه.
Hung S-H, Yu C-W, and Lin C. H. 2005. Hydrogen peroxide functions as a stress signal in plants. Botanical studies Bull. Academic journal. 46: 1-10.
Loreto F, Velikova V. 2001. Isoprene produced by leaves protects the photosynthetic apparatus against ozone damage, quenches ozone products, and reduces lipid peroxidation of cellular membranes. Plant Physiology. 127: 1781-1787.
Neil S.J, Desikan R, Clarke A, Hurs R. D, Hancock J.T. 2002. Hydrogen peroxide and nitric oxide as signaling molecules in plants. Journal of Experimental Botany. 53: 1237-1247.
عضو هیات علمی دانشکده کشاورزی دانشگاه شهید چمران اهواز هستم و این وبلاگ را برای به اشتراک گذاشتن تجربیات شخصی در زمینه علوم زراعت و فیزیولوژی گیاهان زراعی با دانشجویان و دانش پژوهان علاقه مند و همچنین ذکر نکاتی ادبی و اخلاقی برای اشاعه فرهنگ آموزش رایگان برای همه ایرانیان ایجاد کرده ام. مطمئنا این وبلاگ دارای کاستی های فراوانی است که امیدوارم با در نظر گرفتن نظرات ارزشمند شما آن را روز به روز بهبود بخشم.